• 肉牛傳染性鼻氣管炎的活體癥狀、實驗室檢驗及

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    肉牛傳染性鼻氣管炎的活體癥狀、實驗室檢驗及其對策

    肉牛傳染性鼻氣管炎的活體癥狀、實驗室檢驗及其對策

    肉牛傳染性鼻氣管炎是由于感染皰疹病毒而導致的一種病毒病,通常在氣候寒冷的季節容易發生。該病會導致育肥肉牛生長和增重緩慢,母牛泌乳量顯著減少,甚至停止泌乳,種公牛感染后會導致精液帶毒,嚴重損害養牛業的經濟效益?,F通過對該病的活體癥狀、實驗室檢驗進行分析。下面具體來了解一下:肉牛傳染性鼻氣管炎的活體癥狀、實驗室檢驗及其對策。

    1、發病機制

    瘡疹病毒的典型特征是泛嗜性,能夠使多種組織器官發生病變,表現出多種不同的臨床癥狀。通過鼻腔感染的病毒,先是附著在上呼吸道和扁桃體黏膜上大量繁殖,隨著滴度的不斷升高會逐漸蔓延至結膜,并經由神經軸突到達三叉神經節,導致結膜炎和腦炎。通過生殖系統感染的病毒,附著在陰道或包皮黏膜內不斷繁殖,使其發生病變,接著會擴散到薦神經節,并在該處潛伏下來。該病的基本特征是持續感染和潛伏感染。

    一般來說,病毒會持續存在于感染牛的上呼吸道、生殖道上皮組織以及神經節內,甚至能夠持續終生,尤其是中和抗體無法作用于潛伏病毒,在發生分娩、運輸等應激因素,以及具有免疫抑制作用的激素(如促腎上腺皮質激素、地塞米松等)能夠促使處于潛伏感染狀態的病毒被激活,引起間歇性排毒,從而導致帶毒牛再次成為該病的傳染源。

    2、活體癥狀

    呼吸系型。急性感染時可導致病毒侵入到整個呼吸道,但只可輕度感染消化道。發病初期,病牛體溫能夠升高超過40℃,精神非常萎靡,食欲廢絕,有大量的黏液膿性分泌物從鼻腔中流出,鼻黏膜明顯充血,形成淺潰瘍。鼻竇以及鼻鏡由于組織嚴重發炎,導致鼻黏膜逐漸出現壞死,呼出的氣體中往往散發惡臭味。呼吸道往往由于被炎性滲出物阻塞而引起呼吸困難,呈現張口呼吸,呼吸淺且快,一般還伴有疼痛性咳嗽。如果炎癥擴散到眼部,就會引起結膜角膜炎。

    生殖道感染型。發病初期,病牛稍微發熱,精神萎靡,停止采食,經常排尿,并伴有疼痛感,嚴重時往往會將尾巴向上豎起,不斷擺動,煩躁不安。母牛陰門發生水腫,有大量黏液從陰門下聯合處呈線條狀流出,導致周圍皮膚被污染。陰道充血、發炎,且底面上存在大量黏稠狀的黏液性分泌物,但沒有臭味。陰門黏膜上存在大量白色的小結節,之后逐漸發展成膿皰,隨著膿皰的逐漸增多,會相互發生融合,形成一個較大面積的灰白色壞死膜,將壞死膜擦去或者壞死膜發生脫落,會形成一個紅色的創面,隨著病程的進展,會逐漸在陰道前庭以及整個陰道壁都出現該癥狀。

    3、實驗室檢驗

    樣品的收集和處理。在病牛感染早期,根據其表現出的臨床癥狀選擇在相應部位采取病料,都要懸浮在運輸培養基,即添加有2%犢牛血清以及適量抗生素的組織培養液,放在4℃下儲存,并立即運送到實驗室。運送到實驗室的樣品,在運輸培養基中用拭子充足攪動,促使洗脫病毒,接著在室溫條件下放置30min,然后將拭子取出,以1500r/min的速度進行10min離心,取上清液用于分離病毒。需要注意的是,從精液中分離病毒時,要對其進行特殊處理,這是由于精液中混雜能夠毒害細胞或者抑制病毒增殖的酶以及其他因子。

    病毒分離。病毒可使用多種細胞分離,如原代或者次代牛睪丸、肺或者腎細胞都較適宜。選用24孔塑料培養板,在每孔需添加100~200μL細胞培養物上清液,經過1h吸附將液體傾去,接著添加維持液。每天對細胞病變進行觀察,通常在3天之后會出現CPE。細胞發生的典型變化是逐漸圓縮,并聚集形成葡萄樣的群落,并在單層細胞上出現空洞,有時還能夠看到有多個細胞核的巨大細胞。如果經過7天依舊沒有出現CPE,則要再進行1次盲傳,然后多次凍融培養物后進行離心,取其上清液在新的單層細胞上接種用于進一步分離病毒。為鑒定引起細胞發生病變的病毒是否為感染皰疹病毒,還必須取細胞培養的上清液同單特異感染皰疹病毒抗血清或者單克隆抗體進行中和試驗。

    核酸檢測。主要是指DNA-DNA雜交以及聚合酶鏈反應(PCR)。一般來說,PCR的靈敏性要高于病毒分離,其陽性檢出率能夠比病毒分離提高5倍,甚至能夠檢出3個分子的病毒。

    結果解釋。在肉牛體內分離到感染皰疹病毒并不能說明是由該病毒引發疾病,這是由于檢出的病毒可能是受到應激而被激活的潛伏病毒,因此只有對多頭肉牛就進行檢查,并結合血清學檢查抗體陽轉或者感染皰疹病毒抗體滴度升高4倍或者更高,通過實驗室診斷才能夠確診。收集鼻拭子的牛只要間隔2~3周進行2次采血,且雙份血清樣品要確保進行同一個血清學實驗。

    4、對策

    引種前必須進行血清學檢測,確保將疑似陽性或者陽性牛淘汰。牛到場后,必須經過一段時間的隔離飼養才能夠正式進入生產區,對于表現出臨床癥狀的要馬上進行撲殺。牛舍間必須采取相應的消毒,并在牛群飼養過程要定期進行血清學監測,已將陽性感染牛及時淘汰。只要牛場發生該病,要立即進行封鎖、檢疫,并對病?;蛘吒腥九_M行撲殺,同時全面消毒牛舍。

    臨診癥狀

    自然感染潛伏期一般為4-6天,人工感染(氣管內、鼻內、陰道滴注接種)時,潛伏期可縮短至18-72小時,可表現以下臨診類型:

    (一)鼻氣管炎 最常見的癥狀,有輕有重。病初高熱(40-42℃),精神萎頓,厭食,流淚,流涎,流粘膿性鼻液。母牛乳產量突然下降。鼻粘膜高度充血,呈火紅色,并出現淺的、粘膜壞死。呼吸高度困難,呼出氣體惡臭,咳嗽不常見。一般經10-14天左右癥狀消失。

    (二)傳染性膿皰性陰道炎 病初輕度發熱,食欲無影響,產奶量無明顯改變。動物表現不安,頻尿,排尿時因疼痛而尾部高舉。外陰和陰道粘膜充血潮紅,有時粘膜上面散在有灰黃色、粟粒大的膿皰,陰道內見有多量的粘膿性分泌物。重癥病例,陰道粘膜被覆偽膜,并見有潰瘍。孕牛一般不發生流產。病程約2周左右。

    (三)傳染性龜頭包皮炎 龜頭、包皮、陰莖等充血,有時可見陰莖彎曲或形成潰瘍等。多數病例見有精囊腺變性、壞死。通常在出現病變后一周開始痊愈,徹底痊愈需兩周左右。若為種公牛,患病后3-4月間,失去配種能力,但可成為傳染源,應及時淘汰。

    (四)角膜結膜炎 多與上呼吸道炎癥合并發生,病初由于眼瞼水腫和眼結膜高度充血,流淚,角膜輕度混濁,一般無潰瘍,無明顯的全身反應。重癥病例,可見眼結膜形成灰黃色針頭大顆粒,致使眼瞼粘著和眼結膜外翻。眼、鼻流漿性或膿性分泌物。

    (五)流產 一般見于初胎青年母牛懷孕期的任何階段,有時亦見于經產牛。常于懷孕的第5-8個月發生流產,多無前驅癥狀,約有50%流產牛見有胎衣滯留,流產胎兒不見有特征性肉眼病變。

    (六)腸炎 生后2-3周的犢牛感染不娠妊的原因。

    上述癥狀往往不同程度的同時存在,很少單獨發生。

    發病機理及病理變化

    病毒常常經上呼吸道粘膜、生殖道粘膜侵入,還可經眼結膜上皮和軟殼蜱侵入,是否經口腔感染仍未證實。經上呼吸道入侵的病毒沿粘膜、神經纖維、淋巴管擴散到鄰近部位引起上呼吸道炎癥、結膜炎。雖然血液的細胞成分在病毒復制、擴散中起重要作用,但很少觀察到病毒血癥。在病毒血癥期間,病毒可侵入呼吸道深部、中樞神經系統、胎犢中,在這些部位引起病變,表現發熱性全身性呼吸器官疾病、腦膜腦炎或流產。因條件致病菌易在發炎的粘膜中繁殖,所以有時還可能發生繼發性炎癥病變如肺炎。

    呼吸道病變表現在上呼吸道粘膜的炎癥,竇內充滿滲出物,粘膜上覆有粘膿性、惡臭的滲出物組成的偽膜。在極少數病例,肺小葉間水腫,一般不發生肺炎。組織學檢查,粘膜面可見嗜中性粒細胞浸潤,粘膜下層有淋巴細胞、巨噬細胞及漿細胞的浸潤。在疾病早期,氣管上皮細胞內見有Cowdry A型包涵體。

    受侵害的消化道表現頰粘膜、唇、齒齦和硬腭潰瘍(與粘膜病不同),在食道、前胃、真胃也可見同樣的病變,腸表現卡他性炎癥。組織學檢查,上皮細胞空泡變性,派伊爾結(Peyer’s patches)壞死,肝可見壞死灶、核內包涵體。

    生殖道型的病例,表現外陰、陰道、宮頸粘膜、包皮、陰莖粘膜的炎癥,一些病例可發生子宮內膜炎。組織學檢查,見有壞死灶區積聚大量嗜中性白細胞,壞死灶周圍組織有淋巴細胞浸潤,并能檢出包涵體。

    流產胎兒體內所見的肉眼變化,幾乎是由于死后所致。組織學檢查,在肝、肺、脾、胸腺、淋巴結和腎等臟器常發生彌漫性的灶狀壞死。由于胎兒物均系死后排出,因機體自溶,包涵體多已消失,很難檢出。

    患有腦膜腦炎的病例,除腦膜輕度充血外,眼觀上無明顯變化。組織學檢查可見淋巴細胞性腦膜炎及由單核細胞形成血管套為主的病變。

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