• 羊李氏桿菌病的臨床癥狀及防治方法 雞李氏桿菌

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    羊李氏桿菌病的臨床癥狀及防治方法 雞李氏桿菌病的病因及防治方法

    羊李氏桿菌病的臨床癥狀及防治方法 雞李氏桿菌病的病因及防治方法

    李氏桿菌病是由單核細胞增多性李氏桿菌所致的一種傳染病,以腦膜炎、流產或敗血癥為特征。綿羊、牛、馬、犬、雞等對此病易感,該病主要在畜群中暴發,主要是流產或新生畜敗血癥。下面我們就現通過對該菌的流行病學、臨床癥狀、診斷及防治能方面進行介紹羊李氏桿菌病的臨床癥狀及防治方法 雞李氏桿菌病的病因及防治方法。一起來具體了解一下:

    1、病原學

    病原菌是單核細胞增多性李氏桿菌,從患病動物體可分得此菌的純培養。已經鑒定的有五個血清型及若干亞型。在家畜自然病例中最常見的血清型是4B,已確定第五個血清型是綿羊流產的一種病原,但其致病力顯然較弱。所有血清型菌種的傳染病和致病性都很弱,當宿主的抵抗力降低后方能產生疾病。

    2、流行病學

    雖然嚴重的營養缺乏是暴發該病最普遍的先兆,但一般認為飼喂發酵不良的青貯料也是發病的一個誘因。因為青貯料或者具有提高宿主對此菌易感性的作用,或者是作為此菌生長和保存的一種適宜的培養物質。在優質的青貯料(pH值4.0~4.5)中,單核細胞增多性李氏桿菌雖不能繁殖但也不至于被毀滅,在發酵不完全且pH值高于5.5的腐敗青貯料中,此菌能夠生存而且可以繁殖。綿羊通常是在開始給予青貯料約3周后暴發此病。

    在受感染動物的糞尿、流產的胎兒、子宮排出物及乳中都含有病菌。雖然已經證明在一群動物之間能直接傳染,但據田間觀察認為也可通過污染的無生命物質來間接傳染,這已在實驗條件下予以證實。該菌的存活期:在綿羊糞便中長達3個月,在潮濕的土壤中為11.5個月,在牛的糞便中為16.5個月,在干燥的蒿桿為207天,在干燥的土壤和糞便中存活2年以上。此菌在零下20℃能存活2年,且能經受反復凍融。從該病的流行病學類型來看,在該病的傳播過程中,帶菌動物起著一部分作用,來自病群的正常動物似乎也可能將此病傳入被引進的畜群。

    3、臨床癥狀

    該病在畜群中暴發時,可以發現腦膜腦炎型及內臟型病例,主要是流產或新生畜敗血癥,但在同一次暴發期間兩種病型很少一起存在。

    李氏桿菌性腦膜腦炎:這一病型在各種動物都曾見到過,表現為一種典型的綜合征,而在豬要比其他動物多,呈現頸部肌肉的不隨意運動并多流口水。在成年牛,病程一般為1~2周,但綿羊及犢牛發病較急,經3~4天死亡。其臨床病癥基本上有“木呆”綜合征,表現為頭抵住固定的物體,一側面部麻痹。病畜抑郁,常達到昏睡程度,自行離群。采食及咀嚼緩慢,可長時呆立,流涎,口角懸有食物。頭頸的姿勢各有不同。多數病例,頭安然的扭向一側,盡管由于在腦干中受害部位的不同,頭或者后仰或向腹部彎曲,但有些病例頭的姿勢也會是正常的。在牛受感染后若干天,常見一只或兩只眼的前房明顯積膿的全眼球炎癥。病畜臥地,其腿部還可活動,但不能站立,死于呼吸衰弱。

    李氏桿菌性流產:牛妊娠7個多月或再晚些時可致死或流產,胎衣滯留,無臨床腦膜腦炎癥狀,有一般的臨床癥狀,體溫可高達40.5℃,在其胎兒的胃中存在單核細胞增多性李氏桿菌。綿羊和山羊妊娠第12周后就發生流產且胎衣不下。母羊若仍保留著胎兒,可因敗血癥而造成一些死亡,但不會發生腦膜腦炎。

    4、診斷

    李氏桿菌病的腦膜腦炎易與牛的醋酮血病的神經型及綿羊的妊娠毒血癥的早期病例相混淆,這兩種病也表現有特征性的遲鈍、離群、明顯的失明及轉圈運動,但不表現面部神經麻痹,也無眼內炎癥。而且牛的醋酮血病是在分娩之后迅即發生,母羊的妊娠毒血癥僅在妊娠后期,而且同時與多胎妊娠及營養狀況不良有關。這兩種疾病的轉圈運動皆伴隨有肌肉,特別是面部肌肉顫搐,這些癥狀只是間歇性地出現。病畜在驚厥發作過后便立即恢復正常的姿勢,且能沿著直線行走?;既焉锒狙Y時,若肌肉的活動大為增加,則可伴隨有體溫升高。這兩種代謝性疾病皆伴有明顯的酮尿。

    5、防治

    該病死亡率高,治療藥物不多,給治療工作帶來了一定難度。平時應加強對動物的飼養管理、防疫和檢疫,驅除和捕殺畜舍附近的鼠類,消滅體外寄生蟲,嚴禁從疫區引進畜禽,發現病畜應及時隔離治療。

    對癥下藥,特別對于有神經性障礙癥狀,筆者認為首選方案,應按病畜癥狀輕重及體重大小分別注射,如25%硫酸鎂另注氯丙嗪等鎮靜解痙藥,即可減少病畜痙攣次數,能量消耗,贏得搶救時間,另用大量的磺胺類藥,劑量(10%的大家畜100~150 mL,中家畜20~40 mL),每天2次,連注2~3天,效果令人滿意。

    應用其他抗生素也均有良好的治療效果,但必須在配合注射硫酸鎂及安定等藥后才可湊效。在隔離治療期,注重嚴防病菌擴散。對畜舍、飼養用具、場地等用3%來蘇兒溶液、5%的漂白粉溶液進行徹底消毒,確保不發生二次傳染。

    雞李氏桿菌病

    雞李氏桿菌病(avian Listeriosos)又稱禽單核細胞增多癥,是由李氏桿菌引起禽類的一種散發性傳染病。雞感染后主要表現為單核細胞增生性腦膜腦炎、壞死性肝炎和心肌炎等癥狀。李氏桿菌還易感染家畜和人,重者表現為腦膜腦炎、流產、敗血癥和單核細胞增多,輕者表現為結膜炎。雞李氏桿菌病引起雞散發性敗血癥,死亡率通常較低,但有時也可高達52%~100%。本病死亡率高低常與是否存在其他疾病混合感染有關。

    病原

    李氏桿菌是一種球桿菌,大小為0.4~0.6μm×0.5~2μm,在兔血瓊脂培養基上生長可長成長達3~30μm的菌絲。普通瓊脂培養出的菌體較體內和含1%葡萄糖瓊脂培養出的小,菌體一般為0.4~0.6μm。菌體多呈單個散在排列,有時呈V字形成對排列,有時呈短鏈排列。李氏桿菌在22℃和37℃時能生長,22~25℃時可形成4根鞭毛,具有運動性。而在37℃時菌體一般不長鞭毛或只長單鞭毛,運動性減弱以至消失。本菌無芽胞、一般無莢膜,革蘭氏染色陽性。但是,在血清葡萄糖蛋白胨中能形成粘多糖莢膜。老齡培養物有時脫色為陰性,菌體染色常呈兩極濃染,容易誤認為是雙球菌。 本菌屬需氧兼性厭氧菌,在普通瓊脂上生長不好,在含血清或血液的瓊脂上生長較好,在血瓊脂上生長形成狹窄的β溶血環。當培養基中含1%葡萄糖及2%~3%甘油時生長更佳。用亞碲酸鉀瓊脂37℃培養24h,呈圓形、隆起、濕潤,直徑平均為0.6mm的黑色菌落。此菌在麥康凱培養基上不生長。據報道,胰蛋白胨瓊脂是培養和保存活菌的最好培養基,菌體在此培養基上具有純凈透明的特點,低倍鏡下菌落有細膩的表面結構和藍綠色的特殊光澤。肉湯培養呈均勻渾濁,有顆粒狀沉淀,不形成菌環及菌膜。在半固體培養基上,細菌沿穿刺線呈彌散性生長,距瓊脂表面數毫米處出現一個倒傘形生長區,呈松樹狀。 李氏桿菌生長范圍為pH5.6~9.8,當小于pH5.6時會死亡。此菌無耐酸能力,在糖發酵管中分離不到活菌。生長溫度為25~42℃,一般選擇30~38℃培養。動力觀察的最佳溫度為22--25℃培養。 能發酵多種糖類,對葡萄糖、水楊苷,37"C24h內產酸,對乳糖、麥芽糖、蔗糖、阿拉伯糖、山梨醇、甘油和糊精等3~10天產酸或不發酵,而對棉籽糖、肌醇、菊糖、甘露醇等不發酵。甲基紅、MR、VP、過氧化氫酶、七葉苷、接觸酶陽性。尿素酶、明膠、 H2S試驗陰性。不還原硝酸鹽,石蕊牛乳在24h微酸,但不凝固。 李氏桿菌對物理和化學因素抵抗力較強。在土壤、糞便、青貯飼料和干草內能長期存活。對堿和鹽的耐受力較強,在20%食鹽溶液內可長期存活,2.5%苛性鈉經20min細菌才能被殺死。70%酒精、2.5%石炭酸經5min殺死。60~70℃經5~10min可殺死。對青霉素G、氨芐青霉素、四環素、氯霉素、新霉素和磺胺嘧啶鈉敏感,其中敏感性最高的是氨芐青霉素。 根據菌體O抗原和鞭毛抗原的不同,最初用凝集素吸收試驗法曾查出本菌有4種抗原型(即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型),其中有的可再分為若干亞型,Ⅰ型見于豬、禽、嚙齒類,Ⅳ型見于畜禽,人類4個型都可致病,在國外Ⅰ型和Ⅳ型有商品化抗血清。后來又鑒定了12個血清型變種。

    流行病學

    本病易感動物種類甚廣,雞、鴨、火雞、鵝和金絲雀等對本病易感,其中以各種不同年齡的雞更易感,多呈敗血經過。 實驗動物中,小鼠、家兔、豚鼠對本菌易感,皮下注射、肌肉注射易引起死亡;Anton試驗表明,家兔或豚鼠點眼,24~36h后可出現膿性結膜炎。 患病禽類和帶菌者是本病的傳染源。在禽類糞便和鼻分泌物中可檢出此菌,但在蛋內不含此菌。 本病的傳播途徑尚不完全了解??赏ㄟ^消化道、呼吸道、眼結膜及受傷的皮膚感染。污染的飼料、飲水和吸血昆蟲可能是主要的傳播媒介。李氏桿菌可在土壤中存活1~2年,并能抵抗反復凍融,接觸污染土壤也可感染本病。李氏桿菌在禽類糞便和鼻粘膜中均可短期存在,通常因接觸病禽而迅速傳播此病。 本病的流行特點為散發型,偶爾呈地方性流行,發病率低,致死率高(52%~100%)。發病季節多在3~5月份,冬季亦有發生。各種年齡的禽類都易感,但幼齡比成年禽易感,發病也較急,多呈敗血經過。在冬季缺乏青飼料、營養不良,氣候驟變,粘膜抵抗力低下,寄生蟲或沙門氏菌感染、維生素A和維生素B缺乏時,均可構成本病誘因。

    臨床癥狀

    李氏桿菌自然感染的潛伏期很不一致,一般為2~3周。本病主要危害2月齡以下的雛雞。發病前無明顯臨診癥狀,突然發病。病初精神萎頓,羽毛粗亂,離群孤偶,下痢,食欲不振,雞冠、肉髯發紺,病禽嚴重脫水,皮膚呈暗紫色。隨病程發展,兩翅下垂,兩腿軟弱無力,行動不穩,臥地不起,倒地側臥,兩腿不停劃動。有的則表現為無目的地亂跑、尖叫,頭頸側彎、仰頭,腿部發生陣發性抽搐,神志不清,最終死亡,病程1~3周。死亡率可高達85%以上。雞的李氏桿菌病多與寄生蟲病、雞白痢、雞白血病等合并發生,可使癥狀復雜化。

    病理變化

    剖檢可見敗血癥變化。腦膜和腦血管明顯充血。心肌有壞死灶,心包積液,心冠脂肪出血。肝臟呈土黃色,腫大,并有黃白色壞死點和深紫色瘀血斑,質脆易碎。脾臟腫大,呈黑紅色。腺胃、肌胃和腸粘膜出血,粘膜脫落呈卡他性炎癥。有的腹腔內含有大量血樣物。腎亦腫大、炎癥變化。 顯微鏡檢查,在變性或壞死的區域可觀察到大量的單核細胞浸潤,壞死區及其周圍可見革蘭氏陽性桿菌。腦組織變化,神經膠質細胞增生以及大腦髓質形成血管套。在敗血癥時,常見肝化膿灶及心肌變性。肝、腦病變區以淋巴細胞、巨噬細胞和漿細胞浸潤為特征。

    診斷鑒別

    1.病原學檢查 (1)涂片檢查:采病死禽的血液、肝、脾、腎、腦脊髓液、腦組織等做觸片或涂片,革蘭氏染色,鏡檢有呈單個、V字形或并列的革蘭氏陽性小桿菌。 (2)病原分離培養:取腦、淋巴結或肝等病料,接種于兔鮮血瓊脂培養基、0.05%亞碲酸鹽胰蛋白瓊脂平板、0.1%葡萄糖血清肉湯、Martin瓊脂斜面和Martin肉湯培養基中分離培養。在血瓊脂上菌落周圍有溶血環;亞碲酸鹽瓊脂上則呈黑色菌落;葡萄糖血清肉湯中呈均勻渾濁,有顆粒狀沉淀,不形成菌環及菌膜;Martin瓊脂斜面上可見乳白色、大小不一、圓形、邊緣光滑、透明的小菌落;Martin肉湯中呈均勻渾濁,管底有黃色沉淀。 (3)病原體鑒定:取典型的單個菌落經純培養后進行生化反應。李氏桿菌能發酵多種糖類,如葡萄糖、麥芽糖、七葉苷、果糖、海藻糖和水楊素等產酸不產氣。緩慢發酵乳糖、蔗糖、阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖、糊精、山梨醇和甘油。不液化明膠,接觸酶陽性,甲基紅與VP反應陽性。不形成吲哚,不分解尿素,不能還原硝酸鹽。 (4)動物試驗:病料制成懸液,以普通肉湯(如胰蛋白酶大豆肉湯,腦心浸液)以1:1稀釋,用研缽或勻漿器勻漿。將懸液通過腹腔、腦腔、靜脈注射兔子、小鼠或豚鼠,可很快引起試驗動物敗血死亡。點眼,可出現化膿性結膜炎,不久發生敗血死亡。 2.血清學診斷血凝抑制試驗(HIA)、補體結合試驗(CF)、瓊脂擴散試驗(AGP)和免疫熒光試驗(IFA)等可用于本病的診斷。但由于李氏桿菌的自凝性,以及它與金色葡萄球菌、腸球菌等有共同抗原成分,易出現交叉反應,所以在運用血清學診斷時受到很多限制。在國外血清I型和Ⅳ型有商品化抗血清可用于血清型鑒定。 3.單克隆抗體檢測病原菌 (1)應用Farber等報道的診斷李氏桿菌鞭毛抗原的單克隆抗體ELISA檢測程序,該法可在2--3天內從病料中檢出李氏桿菌,此法不能確定李氏桿菌的種間差異。 (2)Buttman研制的15株李氏桿菌屬特異性單克隆抗體構成的夾心ELISA檢測方法,可于增菌后24h內報告陽性結果,最低菌濃度檢出為5×105/ml。 (3)焦新安等研制的C11、B11和B153株單克隆抗體,采用間接免疫熒光和ELISA的方法可快速檢測出李氏桿菌。 (4)范江潔于1995年研制的3株單克隆抗體(LJl0、ALM5和LBll),具有種間特異性。用LJIOA做包被抗體和酶標抗體建立的夾心ELISA方法,測定人工模擬肉樣至少可測出含5個/g細菌的樣品,并在48h得出結果。 (5)細胞株EM-TG1能穩定分泌抗單核細胞增生李氏桿菌的特異單克隆抗體,以此特異的單克隆抗體建立的夾心ELISA方法能于20~24h內檢測出含8~10個/g(ml)細菌的樣品。并可區分單核細胞增生李氏桿菌與非病原性李氏桿菌。 4.應用分子生物學技術快速檢測李氏桿菌的方法Datta等研制成功的β溶血性李氏桿菌特異的DNA探針,以核酸雜交和PCR方法快速檢測單核細胞增生李氏桿菌,用核酸探針技術檢測李氏桿菌,每克樣品中污染一個細菌即可檢測出來,十分敏感、特異,且縮短了檢測時間。到目前為止,許多快速檢測方法還處于實驗室研究階段,要能在實踐中快速、特異、方便地檢測此菌的方法仍有待于繼續研究。

    防制措施

    預防李氏桿菌病,需加強飼養管理,禽舍定期消毒。本病對幼齡雛危害較大,因此加強育雛期的管理,提高機體抵抗力是預防本病的主要措施。同時,注意環境衛生,做好防疫消毒工作,及時發現清除死雞,隔離治療病雞。場地、用具等用3%石炭酸、3%來蘇兒、2%火堿、5%漂白粉等嚴格消毒。注意周圍的疫病信息,防止把病畜禽帶入場內。 發病后,要選用敏感藥物。氨基青霉素和芐基青霉素G對本病菌有抑制作用。鏈霉素有較好治療作用,但易產生抗藥性。有報道使用四環素粉劑,按0.06%~0.1%混入配合飼料內,連續用藥3~5天。慶大霉素注射液用生理鹽水稀釋后每只雛雞5000~10000單位,肌注,每天1次,連續用藥2~3天,有較好治療作用。同時也要重視其他病毒性、細菌性疾病的合并感染,做好早期預防工作。

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